Regeneración ósea en defectos de tamaño crítico de cráneo de rata con matriz ósea desmineralizada. Estudio estereológico, histológico y radiológico mediante tomografía de haz cónico

Tesis doctoral inédita leída en la Universidad Autónoma de Madrid, Facultad de Medicina, Departamento de Cirugía. Fecha de lectura: 11-09-201

Regeneración ósea en un modelo de xenotrasplante de células madre

[ES]El presente estudio, se basa en los aportes de la Ingeniería Tisular a la terapia regenerativa ósea y consiste en evaluar la siguiente hipótesis: el empleo de células madre mesenquimales humanas sobre un soporte de fosfato tricálcico beta, podría inducir la reparación de una lesión ósea de tamaño crítico, mediante regeneración, en un modelo de xenotrasplante en conejos New Zealand inmunocompetentes. Para ello se estudiaron 16 conejos a los que se les provocó una lesión ósea irreparable per se en ambos cóndilos femorales. El cóndilo derecho se rellenó con fosfato tricálcico embebido en células madre mesenquimales humanas y el izquierdo únicamente con fosfato tricálcico, sirviendo como control. A los 3 meses se desarticularon los fémures y se realizó un estudio histológico de los mismos. No se evidenció respuesta inmune del huésped frente a las células humanas o el fosfato tricálcico, y se obtuvo una regeneración casi completa de la lesión en los fémures tratados con fosfato tricálcico y células madre humanas. Este nivel de regeneración fue muy superior al del grupo control a los 3 meses. Además, pudo demostrarse, mediante inmunofluorescencia, que las células madre mesenquimales humanas habían pervivido durante los 3 meses en conejos inmunocompetentes, con proliferación y diferenciación hacia estirpe osteogénica e induciendo la regeneración ósea de la lesión con integración del fosfato tricálcico en las áreas de neoformación

Regeneración ósea de un defecto diafisario bajo la influencia de biomateriales y BMP

Uno de los grandes problemas con los que se enfrentan la cirugía ortopédica y la traumatología actual es la reconstrucción de grandes perdidas óseas. Numerosos estudios se han desarrollado con el fin de encontrar una alternativa a las técnicas clásicas. En este trabajo se estudia la regeneración de un defecto diafisario de 15 mm de longitud en la rata de la cepa nistar. Utilizando el poliácido láctico y la hidronapatita como biomateriales y la proteína morfogenética ósea (BMP) como sustancia osteoinductiva. Los resultados muestran como la asociación de BMP a los biomateriales aumentan la capacidad osteoinductiva de la proteína y demuestran la aparición de tejido óseo y la posibilidad de reparar grandes defectos óseos utilizando esta combinación asociada a métodos clásicos en traumatología

Llenado óseo con BMP-6 en defectos óseos de tres paredes mediante el estimulo directo o indirecto de formación de hueso en perros Beagle

[Tesis] ( Maestría en Ciencias Odontológicas con Especialidad en Periodoncia ) U.A.N.L.UANLhttp://www.uanl.mx

Implementación de un protocolo para la obtención de chips de tejido óseo esponjoso desmineralizado en el banco de tejidos del Hospital Luis Vernaza

El objetivo principal de este estudio fue diseñar un proceso para elaborar tejido óseo desmineralizado en forma de chip para el Banco de Tejidos del Hospital Luis Vernaza (Guayaquil, Ecuador) con un porcentaje de calcio residual por debajo del 8%. La optimización de factores fue realizada usando la metodología de respuesta de superficie (RSM) mediante un diseño central compuesto (DCC) usando el software Design Expert 12. Se evaluó la influencia de las concentraciones de peróxido de hidrógeno y alcohol iso-propílico en la reducción de lípidos. Una vez obtenido un producto con una cantidad de lípidos mínima (menor a 4 %) se procedió con la desmineralización sometiendo el tejido esponjoso con ácido clorhídrico al 0.5 N. Se evaluó la influencia de la temperatura y el tiempo en la desmineralización de tejido óseo. Se realizaron once corridas experimentales por grupo de factores a evaluar y tres corridas para evaluación de resultados de optimización. Las variables usadas en el estudio fueron la concentración de peróxido de hidrógeno entre 10 y 25 %, concentración de alcohol iso-propílico entre 50 y 90 %, temperatura en la que ocurre la reacción entre 25 y 60 ºC y el tiempo que dura la reacción entre 30 y 120 minutos. Además, para lograr estudiar la reacción de desmineralizado de forma controlada y reproducible, se fabricó un reactor de flujo utilizando tecnología de prototipado rápido. Los resultados de optimización en el reactor de flujo mostraron que la combinación de peróxido de hidrógeno 12% y alcohol iso-propílico 80% a una temperatura controlada de 45ºC por un tiempo de 120 minutos logra un porcentaje de lípidos totales del 4 % y un producto con una concentración de calcio residual por debajo del 8%. Las condiciones establecidas pueden implementarse como un proceso de manufactura viable y eficiente para producir en mediana escala chips de matriz ósea desmineralizada proveniente de tejido óseo esponjoso para su uso como aloinjerto.Tesi

Preparación y caracterización de un sustituto óseo inyectable de Hidroxiapatita/Biopolímero/Tetraciclina para ingeniería de tejidos del complejo maxilofacial

El presente trabajo tiene como objetivo desarrollar un sustituto óseo inyectable compuesto de carragenano- hidroxipatita y doxiciclina, que es un tipo de tetraciclina, que sea adecuado para el uso en patologías del complejo maxilofacial ya sean estas derivadas de traumas, infecciones dentales o periodontales y patologías óseas. Se realizaron pruebas mecánicas, de inyectabilidad, degradación, zimografía, antibacterianas y de citotoxicidad que demostraron la aplicación potencial de este material para la rehabilitación oral del paciente adulto, especialmente aquellos afectados por enfermedades o condiciones sistémicas con repercusiones orales como la diabetes, osteoporosis, fumadores pesados y estados post-menopausicos. Se pudo concluir que los tres materiales precursores se complementan en sus funciones como andamio (polímero- carragenano), refuerzo estructural (cerámico-hidroxiapatita), medicamento inmunomodulador (doxiciclina dosis subantimicrobiana); simulando las condiciones del hueso humano, pero mejorando la respuesta biológica especialmente en pacientes con compromisos metabólicos asociados. Se obtuvo entonces, un biomaterial como sustituto óseo promisorio, especialmente en pacientes con compromisos metabólicos que se favorecen mucho en el campo de la inmunomodulación de tejidos; más allá de la ingeniería de tejidos tradicional con un dispensado inyectable que le da adecuada manipulabilidad y conformabilidad según la geometría de cada defecto óseo en particular.Abstract: The present work has as objective to develop an injectable bone substitute composed of carrageenanhydroxyapatite and doxycycline that is a type of tetracycline suitable for use in pathologies of the maxillofacial complex whether these are derived from trauma, dental or periodontal infections and bone pathologies. Mechanical, injectability, degradation, zymography, antibacterial and cytotoxicity tests were performed, demonstrating the potential application of this material for the oral rehabilitation of the adult patient, especially those affected by diseases or systemic conditions with oral repercussions such as diabetes, osteoporosis, heavy smokers and post-menopausal states. It was possible to conclude that the three precursor materials complement each other in their functions as scaffolding (polymer-carrageenan), structural reinforcement (ceramic-hydroxyapatite), immunomodulatory drug (doxycycline subantimicrobial dose) simulating human bone conditions, but improving the biological response especially in patients with associated metabolic compromises. A biomaterial is then obtained as a promissory bone substitute, especially in patients with metabolic compromises that favor much of the field of the immunomodulation of tissues beyond traditional tissue engineering with an injectable dispensing that gives it adequate manipulation and conformability to the geometry of every bone defect in particularMaestrí

Nuevas vías de fabricación de fosfatos de calcio a partir de dos soluciones acuosas

La hidroxiapatita (HA) es el fosfato de calcio más usado para aplicaciones biomédicas, especialmente por su mimetismo con la fase mineral del tejido óseo, sus buenas propiedades osteoconductivas y su excelente biocompatibilidad. Aunque existen diversas técnicas para sintetizar la HA, este proyecto se centra en su obtención a partir de procesos de mineralización de polímeros a partir de soluciones acuosas. Una aplicación de esta estrategia es la impresión y mineralización simultanea de andamios tridimensionales mediante la técnica de robocasting para aplicaciones en el ámbito de la Ingeniería de tejidos. En este proyecto, se precipitaron filamentos mineralizados a partir de dos soluciones separadas, una rica en iones calcio y otra rica en iones fosfato. La solución de fosfato contiene un hidrogel, la carboximetil celulosa (CMC), que proporciona una viscosidad adecuada y suficiente resistencia mecánica para mantener la forma de los precipitados. Se inyectó la solución polimérica/fosfato en las soluciones de sales de calcio para obtener precipitados mineralizados. Durante los ensayos, se variaron diferentes parámetros que tienen un efecto en la precipitación: la concentración en iones calcio y fosfato, la concentración del polímero, el solvente utilizado y la adición de un agente de nucleación. Los análisis de difracción de rayos X revelan que los precipitados obtenidos están compuestos de varias fases minerales según el medio de inyección. Se obtuvieron mayoritariamente filamentos con cristales de HA y minoritariamente filamentos con cristales de Monetita o Brushita. Las imágenes SEM confirmaron la presencia de las fases minerales pero revelan también que la precipitación no ocurre en volumen sino en la superficie de los filamentos en el caso de las concentraciones elevadas de CMC. En cambio se observó la presencia de precipitados en el volumen del filamento cuando se disminuyó la concentración de CMC, lo cual afectó dramáticamente la resistencia de éstos

Osteonecrosis of the femoral head. Utility of cell therapies

RESUMEN: A pesar de ser un tema ampliamente estudiado en la literatura científica, algunos de aspectos de la osteonecrosis no traumática de cabeza femoral, tales como la patógenesis de algunos factores de riesgo y la influencia de estos en la aparición de dicha enfermedad, continúan siendo desconocidos. En este trabajo se pretende hacer un repaso global de la osteonecrosis de cabeza femoral como entidad clínica, su epidemiología, etiopatogenia y diagnóstico, centrándonos especialmente en la terapia de esta patología. Los tratamientos utilizados hasta la actualidad, son en su mayoría agresivos e invasivos, requieren un seguimiento médico y en muchos casos una reintervención. Esto ha dado pie a la aparición delas nuevas terapias que se plantean, basadas en utilización de células y factores de crecimiento, y que ofrecen un futuro esperanzador a estos pacientes.ABSTRACT: Osteonecrosis of femoral head is an area highly studied by scientific literature, butsome of aspects of this pathology, as are its pathogeny or the influence of riskfactors, are still unknown. This research work aims to review the osteonecrosis of femoral head as a disease, its epidemiology, etiopathogenesis and diagnose, especially focusing on the therapy: most of the treatments currently used are aggressive and invasive, require a medical follow-up and, in many cases, also require a second surgical intervention. This drawbacks have given rise to the appearance of new therapies based on the use of cells and growth factors, that offer a hopeful future to these patients.Grado en Medicin

Actividad antimicrobiana de fosfato tricálcico sobre bacilos gram-negativos de la familia enterobacteriaceae y cocos grampositivos

El objetivo del estudio fue demostrar de forma in Vitro la actividad antimicrobiana de fosfato tricálcico (FTC) solo y dopado con diferentes concentraciones de Zinc (Zn) y Magnesio (Mg) sobre bacilos gram-negativos de la familia Enterobacteriaceae y cocos gram-positivos. En el presente estudio se realizó la técnica de difusión en pozo. Los pozos fueron formados por la remoción del Agar y los materiales a evaluar fueron colocados en estos. Se realizaron montajes por triplicado con los fosfatos como con los controles. Los periodos de incubación fueron de 24 horas a 37ºC. Los microorganismos usados fueron: Escherichia coli (CIO 3318), Klebsiella pneumoniae (CIO 2870), Citrobacter freundii (CIO 2868), Enterobacter cloacae (CIO 2912), Proteus mirabilis (CIO 3015), Serratia marcescens (CIO 3022), Salmonella typhi (CIO 3018), Streptococcus mutans (ATCC 25175), Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Enterococcus faecalis (CMPUS 059) y Staphylococcus epidermidis (ATCC 12228).Bacteriólogo (a)Pregrad

Desarrollo de un modelo osteoporótico ovino. Utilización de PRP, BMP-2 y células madre mesenquimales alogénicas en la regeneración de defectos óseos y osteointegración de implantes de titanio = Development of an osteoporotic sheep model bone regenation and titanium implants osseointegration using PRP, BMP-2 and allogeneic mesenchymal stem cells

230 p.El presente trabajo de tesis doctoral describe con detalle la elaboración de un modelo animal osteoporótico en la especie ovina y la aplicación en el mismo de PRP (plasma rico en plaquetas), BMP-2 (proteína morfogenética ósea 2) y ADSCs (células mesénquimales procedentes del tejido adiposo) alogénicas en la regeneración de defectos óseos y la osteointegración de implantes de titanio. En este estudio experimental se emplearon un total de 18 individuos que se dividieron en tres grupos de 6 animales (grupo 1 = control, grupo 2 = osteoporosis, grupo 3 = osteoporosis, defectos e implantes)